【课程大纲】

什么是微生物检验员？

微生物检验员怎么获取？企业怎么获取微生物检验员证书？

酸度
原理：用0.1mol/L的氢氧化钠标准溶液滴定一定量的样品，以酚酞为指示剂，滴定至终点。将滴定所消耗的氢氧化钠溶液的体积乘以相应的系数，获得样品的滴定酸度。
注意事项
滴定管先润洗，滴定前滴定管要排尽气泡。
配置完的氢氧化钠标准滴定溶液需标定出实际浓度。
操作需连续进行（滴定时再加无二氧化碳蒸馏水和酚酞）。
滴定后保持30s不变色再读数。
滴定终点应与标准色对比，以减少系统误差。

一、微生物检验员证书颁发：

CCAA。

二、微生物检验员证书培训费用：

1480元，费用包含：培训费、资料费、证书费、快递费、发票。

1．取经37℃培养18-24小时，金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、铜绿假单胞菌 10104肉汤培养物、 生孢梭菌 64941硫乙醇酸盐培养物1ml+9ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-7为50~100个/ml，做活菌计数备用 2．取经25℃ 培养18~24小时的白色念珠菌霉菌液体培养物1ml+9 ml盐水10倍稀释至10-5 ~10-6为50~100个/ml，做活菌计数备用 3．取经25℃ 培养1周的黑曲霉菌斜面培养物，加3~5ml盐水洗下霉菌孢子，吸取出菌液， 用标准比浊管比浊，与浊度相当后，取1 ml +9 ml盐水=10-1，逐管10倍稀释为10-4约50~100个/ ml，做活菌计数备用

结果判断：供试品组的菌回收率、稀释剂对照组的菌回收率。 试验组的菌回收率=[（试验组平均菌落数–供试品对照组平均菌落数）/菌液组平均菌落数 ]×100% 稀释剂对照组的菌回收率=[（稀释剂对照组的平均菌落数/菌液组的平均菌落数）]×100% ●判断标准: 菌回收率均不低70% 。

试验菌株：按规定检查的控制菌选择相应验证的菌株。 ●阴性对照菌株:设立阴性对照菌是为了验证该控制菌检查方法的专属性。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、梭菌用大肠埃希菌；大肠埃希菌、沙门菌、大肠菌群用金黄色葡萄球菌。 ●菌种的要求：不得超过5代。采用适宜的方法保存。 ●菌液制备:10～100cfu/ml。

三、微生物检验员证书培训内容

1.检验的化学基础;

2.实验室安全知识;

3.实验室常用仪器讲解;

4.检验技术及微生物检验技术，大肠杆菌，菌落总数，无菌、药典、霉菌、酵母菌、金色葡萄球菌，志贺氏菌、溶血性链球菌、绿脓杆菌等菌种的实操视频。

四、微生物检验员证书培训相关

校准 用蒸馏水清洗电极，配好缓冲溶液（或购买）。 用洁净的滤纸吸去电极上面附着的水（注意不能擦拭）。 然后将电极放入PH=7的标准缓冲溶液中，将功能选择开关拨到"TEMP"处，旋转温度补偿器旋钮调整温度值与被测溶液温度相同。 将功能选择开关拨到"PH"位，调节"定位"电位器，使显示值与PH=7标准缓冲液当前温度下的标准值一致（PH=7）。 取出电极，用蒸馏水清洗电极，用洁净的滤纸吸去电极上的水，再放入PH=4的标准缓冲溶液中，调节"斜率"电位器使显示值与PH=4标准溶液在当前温度下的标准值一致(PH=4)。 如需要提高定位精度，可反复进行上述标定步骤2-3次，直到显示值符合两个标准缓冲溶液PH值为止。经标定后的"定位"，"斜率"电位器不得再变动。

未知溶液的测定 仪器标定后，可进行未知溶液PH值的测量。 将电极用蒸馏水清洗干净，用滤纸吸去电极上的水。 将电极放入待测溶液，显示的值为未知溶液的PH值。 如果测量时的溶液温度与标定温度不一致，则需要重新进行温度补偿设置，使设置温度与测量时溶液温度相同，斜率和定位器按钮不必再变动。 测量完毕后用清水洗电极，而后关闭电源，套上电极帽。

五、微生物检验员证书相关

食品微生物学检验的指标 ：食品微生物学检验的指标：细菌菌落总数是反映食品的新鲜度、被细菌污染的程度及在加工过程中细菌繁殖动态的一项指标，是判断食品卫生质量的重要依据。 
2．大肠菌群数：大肠菌群是肠道中普遍存在且数量最多的一群细菌，常将其作为人畜粪便污染的指标，也是评价食品卫生质量的重要依据。
3．致病菌：致病菌的种类繁多、特性各异，一般根据不同食品或不同场合选择不同的致病菌进行检验。
  当某种病流行时，则有必要选检引起该病的病原菌
4、有些霉菌也会产生毒素，从而引起疾病，故也要根据具体情况对霉菌进行检验，  如：黄曲霉菌代谢产生的
黄曲霉毒素能诱发肝癌。







误差是客观存在的 误差分类 ：根据误差产生的原因和性质将误差分为系统误差和偶然误差。 系统误差：又称可测误差，由化验操作过程中某些固定原因造成的。 具有单向性，即正负、大小都有一定的规律性，当重复进行实验分析时会重复出现。 若找出原因，即可设法减少到可忽略的程度。

系统误差 产生原因 方法：指化验方法本身造成的误差。如沉淀的溶解、反应不完全、指示剂终点与化学计量点不符合等。 仪器：由于使用的仪器本身不够精密所造成的。 试剂：由于试剂不纯或蒸馏水不纯，含有被测物或干扰物而引起的误差。 操作：由于化验人员对分析操作不熟练，对终点颜色敏感性不同、对刻度读数不正确等引起。 校正方法： 采用标准方法与标准样品进行对照试验； 校正仪器减小仪器误差； 采用纯度高的试剂校正试剂误差； 提高人员业务水平，减少操作误差。

偶然误差：随机的、不可避免的，呈正态分布又称随机误差，是由某些难以控制、无法避免的偶然因素造成的，其大小与正负都是不固定的。如操作中温度、湿度、灰尘等的影响都会引起分析数值的波动。 产生原因：操作中温度、湿度、灰分等的影响都会引起分析数值的波动。 减少偶然误差应重复多次平行实验并取平均值。 过失误差：操作人员的粗心大意或未按操作规程做，可避免。

1、瓶装液体样品的处理 :用点燃的酒精棉球灼烧瓶口灭菌，接着用石炭酸或来苏尔消毒后的纱布盖好，再用灭菌开瓶器将盖启开； 含有二氧化碳的样品可倒入500mL磨口瓶内，口勿盖紧，覆盖一灭菌纱布，轻轻摇荡，待气体全部逸出后，取样25mL检验。

2、盒装或软塑料包装样品的处理 :将其开口处用75%酒精棉擦拭消毒，用灭菌剪子剪开包装，覆盖上灭菌纱布或浸有消毒液的纱布在剪开部分，直接吸取样品25mL ，或倾入另一灭菌容器中再取样25mL检验。

固体样品的处理：1、捣碎均质法 ;将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g放入带225mL稀释液的无菌均质杯中，8000~10000r/min均质1~2min即可。

剪碎振摇法:将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样进一步剪碎，放入带225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。

研磨法 :将中样(≥100g)剪碎或搅拌混匀，从中取25g检样放入无菌乳钵中充分研磨后，再放入带有225mL无菌稀释液的稀释瓶中，盖紧盖后充分摇匀。

整粒振摇法 :直接称取25g整粒样品置于带有225mL稀释液和直径5mm左右玻璃珠的稀释瓶中，盖紧瓶盖，用力快速振摇50次，振幅要大于40cm。

微生物检验员证书



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【讲师介绍】

微生物检验员
食品化学微生物实验室
医疗器械行业申请GMP
化妆品行业

【培训对象】

1.企业主管食品质量、安全标准及监督管理工作岗位的人员、食品生产企业、经销单位、质量监督部门、卫生检验部门及有关科研、管理部门的管理人员、技术人员和检验人员。

更新时间：2024/3/18 13:49:12